在超净台中倒的平板,然后在生化培养箱中过夜。第二天发现长了大面积的杂菌,这是什么原因造成的?培养皿和培养基都是121度20分钟灭过菌的,培养基在70度的恒温水浴锅中防止凝固。超净台在使用前也是紫外照射20分钟。
如果确定灭菌没问题,那么染菌一般就是无菌操作不合格造成的,比如超净台用之前没有用酒精仔细擦拭,操作时没有开风机,操作时没有在火焰上方进行且培养皿打开角度太大,超净台的空气过滤装置太久没有清理,影响了过滤效果,造成环境中细菌太多.
*怀疑是“培养基在70度的恒温水浴锅中防止凝固“造成的污染,一般培养基都是灭菌后不放汽待锅内自然冷却降压后培养基直接移至超净台冷却至50度左右倒制平板。还有标准灭菌时有灭菌指示剂(商品化的)指示灭菌;不过很多实验室都没有执行。标准操作中平板倒制后还要放在培养箱培养检验平板是否污染。
综其以上,每次操作前后都用酒精棉擦台面吧,倒板前双手要用酒精棉擦或者酒精喷壶喷一喷,然后酒精灯附近操作,防患于未然。
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